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1、傳代保存法
有些微生物當(dāng)遇到冷凍或單調(diào)等處理時(shí)，因此在這種情況下，只能求助于傳代培養(yǎng)保存法。傳代培養(yǎng)便是要守時(shí)地進(jìn)行ATCC細(xì)胞轉(zhuǎn)接、培養(yǎng)后再保存，它是基本的微生物保存法，例如酸奶等常用生產(chǎn)菌種的保存。傳代保存時(shí)，培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營(yíng)養(yǎng)成分不宜過于豐盛，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在或許的范圍內(nèi)盡量下降。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長(zhǎng)溫度為好。若為產(chǎn)酸ATCC細(xì)胞，則應(yīng)在培養(yǎng)基中增加少數(shù)碳酸鈣。一般地，大多數(shù)菌種的保藏溫度以5℃為好，像厭氧菌、霍亂弧菌及部分病原真菌等微生物菌種則可以運(yùn)用37℃進(jìn)行保存，而蕈類等大型食用菌的ATCC細(xì)胞則可以室溫直接保存。

傳代培養(yǎng)保存法盡管簡(jiǎn)練，但其缺陷也很明顯，如：
①ATCC細(xì)胞管棉塞常常簡(jiǎn)略發(fā)霉;
②菌株的遺傳性狀簡(jiǎn)略產(chǎn)生變異;
③重復(fù)傳代時(shí)，菌株的病原性、構(gòu)成生理活性物質(zhì)的才干以及構(gòu)成孢子的才干等均有下降;
④需求守時(shí)轉(zhuǎn)種，作業(yè)量大;
⑤雜菌的污染機(jī)會(huì)較多。

2、液體白臘覆蓋保存法
該法較前一種方法保存ATCC細(xì)胞的時(shí)間更長(zhǎng)，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細(xì)菌等的保存。此法可防止單調(diào)，并經(jīng)過限制氧的供給而到達(dá)削弱微生物代謝作用的目的。其具有方法簡(jiǎn)練的優(yōu)點(diǎn)，一起也適用于不宜冷凍單調(diào)的微生物(如產(chǎn)孢才干低的絲狀菌)的保存，而某些細(xì)菌如固氮菌、乳酸桿菌、明串珠菌、分枝桿菌、紅螺菌及沙門氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克銀漢霉、毛霉、根霉等不宜選用此法進(jìn)行ATCC細(xì)胞保藏。

3、懸液保存法
即便微生物混懸于恰當(dāng)溶液中進(jìn)行保存的方法。常用的有：
① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)留心防止水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長(zhǎng)達(dá)10年。除此之外，也可運(yùn)用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。

在進(jìn)行冷凍單調(diào)時(shí)，需留心以下幾個(gè)問題：
1.冷凍單調(diào)前的培養(yǎng)條件：首要查驗(yàn)ATCC細(xì)胞純度。一般地說，將待保存的微生物在營(yíng)養(yǎng)豐盛且簡(jiǎn)略增菌的培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)為宜;菌齡以到達(dá)對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為好;若為有芽孢或孢子的微生物，則以芽孢和孢子構(gòu)成今后進(jìn)行保存為好;菌液濃度以高為好，如細(xì)菌應(yīng)到達(dá)109～1010/ml。可在安瓶外側(cè)符號(hào)或在安瓶?jī)?nèi)封入標(biāo)簽。
2.安瓶的預(yù)備：將安瓶在2%HCl中浸泡過夜，自來水沖刷3次后，蒸餾水刷凈，單調(diào)，塞棉塞，貼標(biāo)簽，干熱滅菌或溫?zé)釡缇螅?0℃恒溫單調(diào)。
3.ATCC細(xì)胞增加保護(hù)劑：常用的保護(hù)劑有脫脂乳、12%蔗糖、加7.5%葡萄糖的一般肉湯以及加7.5%葡萄糖的血清等等。

4、冷凍單調(diào)保存法
它的原理是首要將微生物冷凍，然后在減壓下使用進(jìn)步現(xiàn)象除去水分。從菌體中除去大部分水分后，細(xì)胞的生理活動(dòng)就會(huì)中止，因此可以到達(dá)長(zhǎng)期保持生命狀況的目的。該方法適用于絕大多數(shù)微生物ATCC細(xì)胞(包括噬菌體和立克次氏體等)的保存。

 在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于不活潑或相對(duì)停止的狀況，才能在一定的時(shí)間內(nèi)使其不發(fā)生變異而又保持生活能力。